Într-un proiect anterior care a testat instalațiile locale de procesare a alimentelor pentru combaterea țânțarilor în Thailanda, s-a constatat că uleiurile esențiale (OE) de Cyperus rotundus, galangal și scorțișoară au o bună activitate anti-țânțari împotriva speciei Aedes aegypti. În încercarea de a reduce utilizarea produselor tradiționale...insecticideși pentru a îmbunătăți controlul populațiilor de țânțari rezistenți, acest studiu a avut ca scop identificarea potențialului sinergism dintre efectele adulticide ale oxidului de etilenă și toxicitatea permetrinei asupra țânțarilor Aedes aegypti, inclusiv tulpinile rezistente și sensibile la piretroizi.
Pentru a evalua compoziția chimică și activitatea de ucidere a OE extras din rizomii de C. rotundus și A. galanga și scoarța de C. verum împotriva tulpinii sensibile Muang Chiang Mai (MCM-S) și a tulpinii rezistente Pang Mai Dang (PMD-R). ) Aedes aegypti activ la adulți. De asemenea, a fost efectuat un biotest pe adulți al amestecului OE-permetrină pe acești țânțari pentru a înțelege activitatea sa sinergică. tulpini de Aedes aegypti.
Caracterizarea chimică utilizând metoda analitică GC-MS a arătat că au fost identificați 48 de compuși din substanțele esențiale (OE) de C. rotundus, A. galanga și C. verum, reprezentând 80,22%, 86,75% și, respectiv, 97,24% din totalul componentelor. Ciperenul (14,04%), β-bisabolenul (18,27%) și cinamaldehida (64,66%) sunt principalele componente ale uleiului de cyperus, uleiului de galangal și, respectiv, uleiului balsamic. În testele biologice de ucidere a adulților, substanțele esențiale (VE) de C. rotundus, A. galanga și C. verum au fost eficiente în uciderea Ae. aegypti, valorile LD50 pentru MCM-S și PMD-R fiind de 10,05 și 9,57 μg/mg femele, 7,97 și 7,94 μg/mg femele și, respectiv, 3,30 și 3,22 μg/mg femele. Eficiența MCM-S și PMD-R Ae în uciderea adulților la *Ae aegypti* în aceste uleiuri esențiale (OE) a fost apropiată de cea a piperonil butoxidului (valori PBO, LD50 = 6,30 și respectiv 4,79 μg/mg femelă), dar nu la fel de pronunțată ca permetrina (valori LD50 = 0,44 și respectiv 3,70 ng/mg femelă). Cu toate acestea, biotestele combinate au constatat sinergie între OE și permetrină. Un sinergism semnificativ cu permetrina împotriva a două tulpini de țânțari *Aedes* a fost observat în mediul endocrinologic (EM) al *C. rotundus* și *A. galanga*. Adăugarea uleiurilor de *C. rotundus* și *A. galanga* a redus semnificativ valorile LD50 ale permetrinei asupra MCM-S de la 0,44 la 0,07 ng/mg și respectiv 0,11 ng/mg la femele, cu valori ale raportului de sinergie (SR) de 6,28 și respectiv 4,00. În plus, OE-urile de C. rotundus și A. galanga au redus semnificativ valorile DL50 ale permetrinei asupra PMD-R de la 3,70 la 0,42 ng/mg și respectiv 0,003 ng/mg la femele, cu valori SR de 8,81 și respectiv 1233,33.
Efect sinergic al unei combinații EO-permetrină pentru a spori toxicitatea la adulți împotriva a două tulpini de țânțari Aedes. Aedes aegypti demonstrează un rol promițător pentru oxidul de etilenă ca agent sinergic în sporirea eficacității anti-țânțari, în special acolo unde compușii tradiționali sunt ineficienți sau nepotriviți.
Țânțarul Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) este principalul vector al febrei dengue și al altor boli virale infecțioase, cum ar fi febra galbenă, chikungunya și virusul Zika, reprezentând o amenințare uriașă și persistentă pentru oameni [1, 2]. Virusul dengue este cea mai gravă febră hemoragică patogenă care afectează oamenii, cu aproximativ 5-100 de milioane de cazuri anual și peste 2,5 miliarde de oameni la nivel mondial expuși riscului [3]. Focarele acestei boli infecțioase reprezintă o povară uriașă pentru populațiile, sistemele de sănătate și economiile majorității țărilor tropicale [1]. Potrivit Ministerului Sănătății din Thailanda, în 2015 au fost raportate 142.925 de cazuri de febră dengue și 141 de decese la nivel național, de peste trei ori mai mult decât numărul de cazuri și decese din 2014 [4]. În ciuda dovezilor istorice, febra dengue a fost eradicată sau redusă considerabil de țânțarul Aedes. În urma controlului Aedes aegypti [5], ratele de infecție au crescut dramatic, iar boala s-a răspândit în întreaga lume, în parte datorită deceniilor de încălzire globală. Eliminarea și controlul *Ae. Aedes aegypti* sunt relativ dificile, deoarece este un vector țânțar domestic care se împerechează, se hrănește, se odihnește și depune ouă în și în jurul locuințelor umane în timpul zilei. În plus, acest țânțar are capacitatea de a se adapta la schimbările sau perturbările de mediu cauzate de evenimente naturale (cum ar fi seceta) sau de măsurile de control umane și poate reveni la numărul său inițial [6, 7]. Deoarece vaccinurile împotriva febrei dengue au fost aprobate abia recent și nu există un tratament specific pentru febra dengue, prevenirea și reducerea riscului de transmitere a febrei dengue depind în întregime de controlul vectorilor țânțari și de eliminarea contactului uman cu vectorii.
În special, utilizarea substanțelor chimice pentru controlul țânțarilor joacă acum un rol important în sănătatea publică, fiind o componentă importantă a managementului integrat și cuprinzător al vectorilor. Cele mai populare metode chimice includ utilizarea insecticidelor cu toxicitate scăzută care acționează împotriva larvelor de țânțari (larvicide) și a țânțarilor adulți (adidocide). Controlul larvelor prin reducerea la sursă și utilizarea regulată a larvicidelor chimice, cum ar fi organofosfații și regulatorii de creștere a insectelor, este considerat important. Cu toate acestea, impactul negativ asupra mediului asociat cu pesticidele sintetice și întreținerea lor complexă și intensivă în muncă rămâne o preocupare majoră [8, 9]. Controlul activ tradițional al vectorilor, cum ar fi controlul adulților, rămâne cel mai eficient mijloc de control în timpul focarelor virale, deoarece poate eradica rapid și pe scară largă vectorii bolilor infecțioase, precum și poate reduce durata de viață și longevitatea populațiilor locale de vectori [3], 10]. Patru clase de insecticide chimice: organoclorurate (denumite doar DDT), organofosfați, carbamați și piretroizi stau la baza programelor de control al vectorilor, piretroizii fiind considerați cea mai de succes clasă. Aceștia sunt foarte eficienți împotriva diferitelor artropode și au o eficacitate scăzută. toxicitate pentru mamifere. În prezent, piretroizii sintetici constituie majoritatea pesticidelor comerciale, reprezentând aproximativ 25% din piața globală de pesticide [11, 12]. Permetrina și deltametrina sunt insecticide piretroide cu spectru larg, utilizate la nivel mondial timp de decenii pentru a controla o varietate de dăunători cu importanță agricolă și medicală [13, 14]. În anii 1950, DDT-ul a fost selectat ca substanță chimică preferată pentru programul național de sănătate publică de control al țânțarilor din Thailanda. În urma utilizării pe scară largă a DDT-ului în zonele endemice de malarie, Thailanda a eliminat treptat utilizarea DDT-ului între 1995 și 2000 și l-a înlocuit cu doi piretroizi: permetrina și deltametrina [15, 16]. Aceste insecticide piretroide au fost introduse la începutul anilor 1990 pentru a controla malaria și febra dengue, în principal prin tratamente cu plase de pat și utilizarea de cețuri termice și spray-uri cu toxicitate ultra-scăzută [14, 17]. Cu toate acestea, acestea și-au pierdut eficacitatea din cauza rezistenței puternice la țânțari și a lipsei de conformitate din partea publicului, din cauza preocupărilor legate de sănătatea publică și de impactul substanțelor chimice sintetice asupra mediului. Acest lucru pune provocări semnificative pentru succesul programelor de control al vectorilor amenințători [14, 18, 19]. Pentru a face strategia mai eficientă, sunt necesare contramăsuri oportune și adecvate. Procedurile de gestionare recomandate includ înlocuirea substanțelor naturale, rotația substanțelor chimice din diferite clase, adăugarea de sinergici și amestecarea substanțelor chimice sau aplicarea simultană a substanțelor chimice din diferite clase [14, 20, 21]. Prin urmare, există o nevoie urgentă de a găsi și dezvolta o alternativă și un sinergist ecologic, convenabil și eficient, iar acest studiu își propune să abordeze această nevoie.
Insecticidele derivate natural, în special cele pe bază de componente vegetale, și-au demonstrat potențialul în evaluarea alternativelor actuale și viitoare de control al țânțarilor [22, 23, 24]. Mai multe studii au arătat că este posibilă controlul vectorilor importanți de țânțari prin utilizarea produselor vegetale, în special a uleiurilor esențiale (OE), ca insecticide pentru adulți. Proprietățile adulticide împotriva unor specii importante de țânțari au fost descoperite în multe uleiuri vegetale, cum ar fi țelina, chimenul, zedoaria, anasonul, ardeiul iute, cimbrul, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosioides, Cochlospermum planchonii, Eucalyptus ter eticornis, Eucalyptus citriodora, Cananga odorata și Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30]. Oxidul de etilenă este utilizat acum nu numai ca atare, ci și în combinație cu substanțe vegetale extrase sau pesticide sintetice existente, producând grade diferite de toxicitate. Combinațiile de insecticide tradiționale, cum ar fi organofosfații, carbamații și piretroizii, cu oxid de etilenă/extracte de plante acționează sinergic sau antagonist în efectele lor toxice și s-au dovedit a fi eficiente împotriva vectorilor de boli și a dăunătorilor [31,32,33,34,35]. Cu toate acestea, majoritatea studiilor privind efectele toxice sinergice ale combinațiilor de fitochimicale cu sau fără substanțe chimice sintetice au fost efectuate pe vectori de insecte și dăunători agricoli, mai degrabă decât pe țânțari importanți din punct de vedere medical. Mai mult, majoritatea lucrărilor privind efectele sinergice ale combinațiilor de insecticide vegetale-sintetice împotriva vectorilor de țânțari s-au concentrat pe efectul larvicid.
Într-un studiu anterior realizat de autori ca parte a unui proiect de cercetare în curs de desfășurare care a analizat substanțele intimicide din plantele alimentare indigene din Thailanda, s-a constatat că oxizii de etilenă din Cyperus rotundus, galangal și scorțișoară au o activitate potențială împotriva țânțarilor Aedes aegypti adulți [36]. Prin urmare, acest studiu și-a propus să evalueze eficacitatea uleiurilor esențiale izolate din aceste plante medicinale împotriva țânțarilor Aedes aegypti, inclusiv a tulpinilor rezistente și sensibile la piretroizi. Efectul sinergic al amestecurilor binare de oxid de etilenă și piretroizi sintetici cu eficacitate bună la adulți a fost, de asemenea, analizat pentru a reduce utilizarea insecticidelor tradiționale și a crește rezistența la vectorii țânțarilor, în special împotriva țânțarilor Aedes aegypti. Acest articol prezintă caracterizarea chimică a uleiurilor esențiale eficiente și potențialul lor de a spori toxicitatea permetrinei sintetice împotriva țânțarilor Aedes aegypti în tulpinile sensibile la piretroizi (MCM-S) și tulpinile rezistente (PMD-R).
Rizomii de C. rotundus și A. galanga și scoarța de C. verum (Fig. 1) utilizați pentru extracția uleiului esențial au fost achiziționați de la furnizori de medicamente pe bază de plante din provincia Chiang Mai, Thailanda. Identificarea științifică a acestor plante a fost realizată prin consultare cu dl. James Franklin Maxwell, botanist-herbar, Departamentul de Biologie, Facultatea de Științe, Universitatea Chiang Mai (CMU), provincia Chiang Mai, Thailanda, și cu omul de știință Wannari Charoensap; în cadrul Departamentului de Farmacie, Facultatea de Farmacie, Universitatea Carnegie Mellon, specimenele dnei Voucher din fiecare plantă sunt depozitate în Departamentul de Parazitologie al Facultății de Medicină a Universității Carnegie Mellon pentru utilizare ulterioară.
Probele de plante au fost uscate individual la umbră timp de 3-5 zile într-un spațiu deschis, cu ventilație activă și o temperatură ambientală de aproximativ 30 ± 5 °C, pentru a îndepărta conținutul de umiditate înainte de extracția uleiurilor esențiale naturale (OE). Un total de 250 g din fiecare material vegetal uscat a fost măcinat mecanic într-o pulbere grosieră și utilizat pentru a izola uleiurile esențiale (OE) prin distilare cu abur. Aparatul de distilare a constat dintr-o mantă electrică de încălzire, un balon cu fund rotund de 3000 ml, o coloană de extracție, un condensator și un dispozitiv Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokyo, Japonia). Se adaugă 1600 ml de apă distilată și 10-15 bile de sticlă în balon și apoi se încălzește la aproximativ 100°C folosind un încălzitor electric timp de cel puțin 3 ore, până când distilarea este completă și nu se mai produce OE. Stratul de EO a fost separat de faza apoasă folosind o pâlnie de separare, uscat peste sulfat de sodiu anhidru (Na2SO4) și depozitat într-o sticlă maro sigilată la 4°C până la examinarea compoziției chimice și a activității adulte.
Compoziția chimică a uleiurilor esențiale a fost determinată simultan cu biotestul pentru substanța adultă. Analiza calitativă a fost efectuată utilizând un sistem GC-MS format dintr-un cromatograf de gaze Hewlett-Packard (Wilmington, CA, SUA) 7890A echipat cu un detector selectiv de masă cu un singur cuadripol (Agilent Technologies, Wilmington, CA, SUA) și un MSD 5975C (EI). (Agilent Technologies).
Coloană cromatografică – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × grosimea filmului 0,25 µm). Timpul total de rulare GC-MS a fost de 20 de minute. Condițiile de analiză sunt următoarele: temperaturile injectorului și liniei de transfer sunt de 250 și respectiv 280 °C; temperatura cuptorului este setată să crească de la 50 °C la 250 °C cu o rată de 10 °C/min, gazul purtător este heliu; debit 1,0 ml/min; volumul injecției este de 0,2 µL (1/10% în volum în CH2Cl2, raport de divizare 100:1); pentru detectarea GC-MS se utilizează un sistem de ionizare electronică cu o energie de ionizare de 70 eV. Intervalul de achiziție este de 50–550 unități de masă atomică (amu), iar viteza de scanare este de 2,91 scanări pe secundă. Procentele relative ale componentelor sunt exprimate ca procente normalizate prin aria vârfului. Identificarea ingredientelor EO se bazează pe indicele lor de retenție (RI). RI a fost calculat folosind ecuația lui Van den Dool și Kratz [37] pentru seria de n-alcani (C8-C40) și comparat cu indicii de retenție din literatura de specialitate [38] și din bazele de date ale bibliotecilor (NIST 2008 și Wiley 8NO8). Identitatea compușilor prezentați, cum ar fi structura și formula moleculară, a fost confirmată prin comparație cu probele autentice disponibile.
Standardele analitice pentru permetrina sintetică și piperonil butoxid (PBO, control pozitiv în studiile de sinergie) au fost achiziționate de la Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SUA). Kiturile de testare pentru adulți și dozele de diagnostic din hârtie impregnată cu permetrină (0,75%) emise de Organizația Mondială a Sănătății (OMS) au fost achiziționate comercial de la Centrul OMS pentru Controlul Vectorilor din Penang, Malaezia. Toate celelalte substanțe chimice și reactivi utilizați au fost de calitate analitică și au fost achiziționați de la instituții locale din provincia Chiang Mai, Thailanda.
Țânțarii utilizați ca organisme de testare în biotestul pentru adulți au fost țânțari Aedes aegypti de laborator care se împerechează liber, inclusiv tulpina sensibilă Muang Chiang Mai (MCM-S) și tulpina rezistentă Pang Mai Dang (PMD-R). Tulpina MCM-S a fost obținută din probe locale colectate în zona Muang Chiang Mai, provincia Chiang Mai, Thailanda, și a fost menținută în sala de entomologie a Departamentului de Parazitologie, Facultatea de Medicină CMU, din 1995 [39]. Tulpina PMD-R, care s-a dovedit a fi rezistentă la permetrină, a fost izolată din țânțari de câmp colectați inițial din Ban Pang Mai Dang, districtul Mae Tang, provincia Chiang Mai, Thailanda, și a fost menținută la același institut din 1997 [40]. Tulpinile PMD-R au fost cultivate sub presiune selectivă pentru a menține nivelurile de rezistență prin expunere intermitentă la permetrină 0,75% folosind kitul de detectare OMS cu unele modificări [41]. Fiecare tulpină de Ae. Aedes aegypti a fost colonizat individual într-un laborator fără agenți patogeni, la 25 ± 2 °C și o umiditate relativă de 80 ± 10% și o fotoperioadă lumină/întuneric de 14:10 ore. Aproximativ 200 de larve au fost ținute în tăvi de plastic (33 cm lungime, 28 cm lățime și 9 cm înălțime) umplute cu apă de la robinet, la o densitate de 150-200 de larve per tavă, și hrănite de două ori pe zi cu biscuiți sterilizați pentru câini. Viermii adulți au fost ținuți în cuști umede și hrăniți continuu cu o soluție apoasă de zaharoză 10% și o soluție de sirop multivitaminic 10%. Femelele de țânțari sug în mod regulat sânge pentru a depune ouă. Femelele cu vârsta cuprinsă între două și cinci zile, care nu au fost hrănite cu sânge, pot fi utilizate continuu în teste biologice experimentale pe adulți.
Un biotest doză-mortalitate al OE a fost efectuat pe țânțari Aedes aegypti adulți, femele, MCM-S și PMD-R, utilizând o metodă topică modificată conform protocolului standard al OMS pentru testarea sensibilității [42]. OE din fiecare plantă a fost diluat în serie cu un solvent adecvat (de exemplu, etanol sau acetonă) pentru a obține o serie gradată de 4-6 concentrații. După anestezia cu dioxid de carbon (CO2), țânțarii au fost cântăriți individual. Țânțarii anesteziați au fost apoi ținuți nemișcați pe hârtie de filtru uscată, pe o placă rece personalizată, sub un stereomicroscop, pentru a preveni reactivarea în timpul procedurii. Pentru fiecare tratament, 0,1 μl de soluție OE au fost aplicați pe pronotul superior al femelei utilizând un microdispenser portabil Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, SUA). Douăzeci și cinci de femele au fost tratate cu fiecare concentrație, mortalitatea variind de la 10% la 95% pentru cel puțin 4 concentrații diferite. Țânțarii tratați cu solvent au servit drept control. Pentru a preveni contaminarea probelor de testare, înlocuiți hârtia de filtru cu o hârtie de filtru nouă pentru fiecare OE testat. Dozele utilizate în aceste bioteste sunt exprimate în micrograme de OE per miligram de greutate corporală a femelelor vii. Activitatea PBO la adulți a fost, de asemenea, evaluată într-un mod similar cu OE, PBO fiind utilizat ca și control pozitiv în experimentele sinergice. Țânțarii tratați din toate grupurile au fost plasați în pahare de plastic și li s-a administrat 10% zaharoză plus 10% sirop multivitaminic. Toate biotestele au fost efectuate la 25 ± 2 °C și 80 ± 10% umiditate relativă și repetate de patru ori cu controalele. Mortalitatea în timpul perioadei de creștere de 24 de ore a fost verificată și confirmată prin lipsa de răspuns a țânțarului la stimularea mecanică și apoi înregistrată pe baza mediei a patru replicări. Tratamentele experimentale au fost repetate de patru ori pentru fiecare probă de testare folosind loturi diferite de țânțari. Rezultatele au fost rezumate și utilizate pentru a calcula rata procentuală a mortalității, care a fost utilizată pentru a determina doza letală pe 24 de ore prin analiza probit.
Efectul anticidul sinergic al OE și permetrinei a fost evaluat utilizând o procedură de testare a toxicității locale [42], așa cum s-a descris anterior. Se utilizează acetonă sau etanol ca solvent pentru a prepara permetrina la concentrația dorită, precum și un amestec binar de OE și permetrină (EO-permetrină: permetrină amestecată cu OE la concentrația DL25). Kiturile de testare (permetrină și OE-permetrină) au fost evaluate în raport cu tulpinile MCM-S și PMD-R de Ae. Aedes aegypti. Fiecare dintre cele 25 de țânțari femele a primit patru doze de permetrină pentru a testa eficacitatea acesteia în uciderea adulților, fiecare tratament repetându-se de patru ori. Pentru a identifica candidații sinergici ai OE, s-au administrat 4 până la 6 doze de EO-permetrină fiecăruia dintre cele 25 de țânțari femele, fiecare aplicare repetându-se de patru ori. Tratamentul cu PBO-permetrină (permetrină amestecată cu concentrația DL25 de PBO) a servit, de asemenea, ca un control pozitiv. Dozele utilizate în aceste bioteste sunt exprimate în nanograme de probă testată per miligram de greutate corporală vie a femelei. Au fost efectuate patru evaluări experimentale pentru fiecare tulpină de țânțar pe loturi crescute individual, iar datele privind mortalitatea au fost reunite și analizate folosind Probit pentru a determina o doză letală pe 24 de ore.
Rata mortalității a fost ajustată folosind formula Abbott [43]. Datele ajustate au fost analizate prin analiza de regresie Probit utilizând programul de statistică SPSS (versiunea 19.0). Valorile letale de 25%, 50%, 90%, 95% și 99% (DL25, DL50, DL90, DL95 și respectiv DL99) au fost calculate folosind intervalele de încredere de 95% corespunzătoare (IC 95%). Măsurătorile de semnificație și diferențele dintre probele testate au fost evaluate folosind testul chi-pătrat sau testul Mann-Whitney U în cadrul fiecărui test biologic. Rezultatele au fost considerate semnificative statistic la P< 0,05. Coeficientul de rezistență (RR) este estimat la nivelul LD50 folosind următoarea formulă [12]:
RR > 1 indică rezistență, iar RR ≤ 1 indică sensibilitate. Valoarea raportului de sinergie (SR) pentru fiecare candidat sinergist se calculează după cum urmează [34, 35, 44]:
Acest factor împarte rezultatele în trei categorii: o valoare SR de 1±0,05 este considerată a nu avea niciun efect aparent, o valoare SR >1,05 este considerată a avea un efect sinergic, iar o valoare SR a unui ulei lichid galben deschis poate fi obținută prin distilarea cu abur a rizomilor de C. rotundus și A. galanga și a scoarței de C. verum. Randamentele calculate pe greutate uscată au fost de 0,15%, 0,27% (g/g) și, respectiv, 0,54% (v/v). g) (Tabelul 1). Studiul GC-MS al compoziției chimice a uleiurilor de C. rotundus, A. galanga și C. verum a arătat prezența a 19, 17 și 21 de compuși, care au reprezentat 80,22, 86,75 și, respectiv, 97,24% din toate componentele (Tabelul 2). Compușii uleiului de rizom de C. lucidum constau în principal din ciperonen (14,04%), urmat de caralenă (9,57%), α-capselan (7,97%) și α-capselan (7,53%). Principala componentă chimică a uleiului de rizom de galangal este β-bisabolena (18,27%), urmată de α-bergamotenă (16,28%), 1,8-cineol (10,17%) și piperonol (10,09%). În timp ce cinamaldehida (64,66%) a fost identificată drept componentă principală a uleiului de scoarță de C. verum, acetatul cinnamic (6,61%), α-copaena (5,83%) și 3-fenilpropionaldehida (4,09%) au fost considerate ingrediente minore. Structurile chimice ale cipernei, β-bisabolena și cinamaldehida sunt principalii compuși ai C. rotundus, A. galanga și respectiv C. verum, așa cum se arată în Figura 2.
Rezultatele a trei OO-uri au evaluat activitatea adulților împotriva țânțarilor Aedes aegypti sunt prezentate în Tabelul 3. S-a constatat că toți OO-urile au efecte letale asupra țânțarilor Aedes MCM-S la diferite tipuri și doze. Cel mai eficient OO este C. verum, urmat de A. galanga și C. rotundus, cu valori DL50 de 3,30, 7,97 și respectiv 10,05 μg/mg MCM-S la femele, puțin mai mari decât 3,22 (U = 1), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) și 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD-R la femei. Aceasta corespunde unui efect ușor mai mare al PBO asupra PMD-R la adulți decât tulpina MSM-S, cu valori LD50 de 4,79 și, respectiv, 6,30 μg/mg la femele (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057). Se poate calcula că valorile LD50 ale C. verum, A. galanga, C. rotundus și PBO împotriva PMD-R sunt de aproximativ 0,98, 0,99, 0,95 și, respectiv, 0,76 ori mai mici decât cele împotriva MCM-S. Astfel, acest lucru indică faptul că susceptibilitatea la PBO și EO este relativ similară între cele două tulpini de Aedes. Deși PMD-R a fost mai susceptibil decât MCM-S, sensibilitatea Aedes aegypti nu a fost semnificativă. În schimb, cele două tulpini de Aedes au diferit foarte mult în ceea ce privește sensibilitatea lor la permetrin aegypti (Tabelul 4). PMD-R a demonstrat o rezistență semnificativă la permetrină (valoare LD50 = 0,44 ng/mg la femei), cu o valoare LD50 mai mare de 3,70 comparativ cu MCM-S (valoare LD50 = 0,44 ng/mg la femei) ng/mg la femei (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029). Deși PMD-R este mult mai puțin sensibil la permetrină decât MCM-S, sensibilitatea sa la PBO și uleiurile de C. verum, A. galanga și C. rotundus este puțin mai mare decât cea a MCM-S.
Așa cum s-a observat în biotestul combinației EO-permetrină pe populația adultă, amestecurile binare de permetrină și EO (DL25) au prezentat fie sinergie (valoare SR > 1,05), fie niciun efect (valoare SR = 1 ± 0,05). Efecte complexe asupra adulților ale unui amestec EO-permetrină asupra țânțarilor albinoși experimentali. Tulpinile Aedes aegypti MCM-S și PMD-R sunt prezentate în Tabelul 4 și Figura 3. S-a constatat că adăugarea de ulei de C. verum reduce ușor DL50 a permetrinei împotriva MCM-S și crește ușor DL50 împotriva PMD-R la 0,44–0,42 ng/mg la femei și respectiv de la 3,70 la 3,85 ng/mg la femei. În schimb, adăugarea de uleiuri de C. rotundus și A. galanga a redus semnificativ DL50 a permetrinei pe MCM-S de la 0,44 la 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) și la 0,11 (U = 0). Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg la femei. Pe baza valorilor DL50 ale MCM-S, valorile SR ale amestecului EO-permetrină după adăugarea de uleiuri de C. rotundus și A. galanga au fost de 6,28, respectiv 4,00. În consecință, DL50 a permetrinei împotriva PMD-R a scăzut semnificativ de la 3,70 la 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) și la 0,003 odată cu adăugarea de uleiuri de C. rotundus și A. galanga (U = 0, Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg femelă. Valoarea SR a permetrinei combinate cu C. rotundus împotriva PMD-R a fost de 8,81, în timp ce valoarea SR a amestecului galangal-permetrină a fost de 1233,33. Comparativ cu MCM-S, valoarea DL50 a PBO-ului de control pozitiv a scăzut de la 0,44 la 0,26 ng/mg (femele) și de la 3,70 ng/mg (femele) la 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) și PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029). Valorile SR ale amestecului PBO-permetrină pentru tulpinile MCM-S și PMD-R au fost de 1,69, respectiv 5,69. Aceste rezultate indică faptul că uleiurile de C. rotundus și A. galanga și PBO sporesc toxicitatea permetrinei într-o măsură mai mare decât uleiul de C. verum pentru tulpinile MCM-S și PMD-R.
Activitatea la adulți (DL50) a OE, PBO, permetrinei (PE) și a combinațiilor acestora împotriva tulpinilor de țânțari Aedes sensibile la piretroizi (MCM-S) și rezistente (PMD-R). Aedes aegypti
[45] Piretroizii sintetici sunt utilizați la nivel mondial pentru a controla aproape toate artropodele de importanță agricolă și medicală. Cu toate acestea, din cauza consecințelor nocive ale utilizării insecticidelor sintetice, în special în ceea ce privește dezvoltarea și rezistența pe scară largă a țânțarilor, precum și impactul asupra sănătății pe termen lung și a mediului, există acum o nevoie urgentă de a reduce utilizarea insecticidelor sintetice tradiționale și de a dezvolta alternative [35, 46, 47]. Pe lângă protejarea mediului și a sănătății umane, avantajele insecticidelor botanice includ selectivitatea ridicată, disponibilitatea globală și ușurința în producție și utilizare, ceea ce le face mai atractive pentru controlul țânțarilor [32,48, 49]. Acest studiu, pe lângă elucidarea caracteristicilor chimice ale uleiurilor esențiale eficiente prin analiza GC-MS, a evaluat și potența uleiurilor esențiale adulte și capacitatea lor de a spori toxicitatea permetrinei sintetice aegypti în tulpinile sensibile la piretroizi (MCM-S) și tulpinile rezistente (PMD-R).
Caracterizarea GC-MS a arătat că cipernul (14,04%), β-bisabolenul (18,27%) și cinamaldehida (64,66%) au fost principalele componente ale uleiurilor de C. rotundus, A. galanga și, respectiv, C. verum. Aceste substanțe chimice au demonstrat diverse activități biologice. Ahn și colab. [50] au raportat că 6-acetoxiciperenul, izolat din rizomul de C. rotundus, acționează ca un compus antitumoral și poate induce apoptoza dependentă de caspază în celulele canceroase ovariene. β-bisabolenul, extras din uleiul esențial de smirnă, prezintă citotoxicitate specifică împotriva celulelor tumorale mamare umane și de șoarece, atât in vitro, cât și in vivo [51]. Cinamaldehida, obținută din extracte naturale sau sintetizată în laborator, a fost raportată ca având activități insecticide, antibacteriene, antifungice, antiinflamatorii, imunomodulatoare, anticancerigene și antiangiogenice [52].
Rezultatele biotestului privind activitatea dependentă de doză la adulți au demonstrat un potențial bun al substanțelor active testate și au arătat că tulpinile de țânțari Aedes MCM-S și PMD-R au avut o susceptibilitate similară la OE și PBO (apă de oxigen). Aedes aegypti. O comparație a eficacității OE și permetrinei a arătat că aceasta din urmă are un efect alergenic mai puternic: valorile DL50 sunt de 0,44 și 3,70 ng/mg la femele pentru tulpinile MCM-S și, respectiv, PMD-R. Aceste constatări sunt susținute de numeroase studii care arată că pesticidele naturale, în special produsele derivate din plante, sunt în general mai puțin eficiente decât substanțele sintetice [31, 34, 35, 53, 54]. Acest lucru se poate datora faptului că primele sunt o combinație complexă de ingrediente active sau inactive, în timp ce cele din urmă sunt un singur compus activ purificat. Cu toate acestea, diversitatea și complexitatea ingredientelor active naturale cu mecanisme de acțiune diferite pot spori activitatea biologică sau pot împiedica dezvoltarea rezistenței în populațiile gazdă [55, 56, 57]. Mulți cercetători au raportat potențialul anti-țânțari al C. verum, A. galanga și C. rotundus și al componentelor acestora, cum ar fi β-bisabolena, cinamaldehida și 1,8-cineolul [22, 36, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64]. Cu toate acestea, o analiză a literaturii de specialitate a relevat că nu au existat rapoarte anterioare despre efectul său sinergic cu permetrina sau alte insecticide sintetice împotriva țânțarilor Aedes. Aedes aegypti.
În acest studiu, s-au observat diferențe semnificative în ceea ce privește sensibilitatea la permetrină între cele două tulpini de Aedes aegypti. MCM-S este sensibil la permetrină, în timp ce PMD-R este mult mai puțin sensibil la aceasta, cu o rată de rezistență de 8,41. Comparativ cu sensibilitatea MCM-S, PMD-R este mai puțin sensibil la permetrină, dar mai sensibil la OE, oferind o bază pentru studii ulterioare care vizează creșterea eficacității permetrinei prin combinarea acesteia cu OE. Un biotest sinergic bazat pe combinații pentru efectele asupra adulților a arătat că amestecurile binare de OE și permetrină au redus sau au crescut mortalitatea la adulți de Aedes aegypti. Adăugarea de ulei de C. verum a scăzut ușor DL50 a permetrinei împotriva MCM-S, dar a crescut ușor DL50 împotriva PMD-R, cu valori SR de 1,05 și, respectiv, 0,96. Acest lucru indică faptul că uleiul de C. verum nu are un efect sinergic sau antagonist asupra permetrinei atunci când a fost testat pe MCM-S și PMD-R. În schimb, uleiurile de C. rotundus și A. galanga au demonstrat un efect sinergic semnificativ prin reducerea semnificativă a valorilor DL50 ale permetrinei asupra MCM-S sau PMD-R. Când permetrina a fost combinată cu OE de C. rotundus și A. galanga, valorile SR ale amestecului OE-permetrină pentru MCM-S au fost de 6,28 și respectiv 4,00. În plus, când permetrina a fost evaluată față de PMD-R în combinație cu C. rotundus (SR = 8,81) sau A. galanga (SR = 1233,33), valorile SR au crescut semnificativ. Este demn de remarcat faptul că atât C. rotundus, cât și A. galanga au crescut semnificativ toxicitatea permetrinei împotriva PMD-R Ae. aegypti. În mod similar, s-a constatat că PBO crește toxicitatea permetrinei cu valori SR de 1,69 și, respectiv, 5,69 pentru tulpinile MCM-S și PMD-R. Deoarece C. rotundus și A. galanga au avut cele mai mari valori SR, acestea au fost considerate a fi cei mai buni sinergici în creșterea toxicității permetrinei asupra MCM-S și, respectiv, PMD-R.
Mai multe studii anterioare au raportat efectul sinergic al combinațiilor de insecticide sintetice și extracte de plante împotriva diferitelor specii de țânțari. Un biotest larvicid împotriva Anopheles Stephensi studiat de Kalayanasundaram și Das [65] a arătat că fenthionul, un organofosfat cu spectru larg, a fost asociat cu Cleodendron inerme, Pedalium murax și Parthenium hysterophorus. S-a observat o sinergie semnificativă între extracte cu un efect sinergic (SF) de 1,31, 1,38, 1,40, 1,48, 1,61 și respectiv 2,23. Într-un screening larvicid al 15 specii de mangrove, extractul de eter de petrol din rădăcini de mangrove s-a dovedit a fi cel mai eficient împotriva Culex quinquefasciatus, cu o valoare LC50 de 25,7 mg/L [66]. Efectul sinergic al acestui extract și al insecticidului botanic piretru a fost, de asemenea, raportat ca reducând LC50 a piretrului împotriva larvelor de C. quinquefasciatus de la 0,132 mg/L la 0,107 mg/L, în plus, în acest studiu a fost utilizat un calcul SF de 1,23. 34,35,44]. Eficacitatea combinată a extractului de rădăcină de Solanum citron și a mai multor insecticide sintetice (de exemplu, fention, cipermetrină (un piretroid sintetic) și timetfos (un larvicid organofosforic)) împotriva țânțarilor Anopheles a fost evaluată. Stephensi [54] și C. quinquefasciatus [34]. Utilizarea combinată a cipermetrinei și a extractului de eter de petrol din fructe galbene a arătat un efect sinergic asupra cipermetrinei în toate raporturile. Cel mai eficient raport a fost combinația binară 1:1 cu valori LC50 și SF de 0,0054 ppm și respectiv 6,83, față de An. Stephen West[54]. În timp ce un amestec binar 1:1 de S. xanthocarpum și temephos a fost antagonist (SF = 0,6406), combinația S. xanthocarpum-fention (1:1) a prezentat activitate sinergică împotriva C. quinquefasciatus cu un SF de 1,3125 [34]]. Tong și Blomquist [35] au studiat efectele oxidului de etilenă din plante asupra toxicității carbarilului (un carbamat cu spectru larg) și permetrinei la țânțarii Aedes. Aedes aegypti. Rezultatele au arătat că oxidul de etilenă din agar, piper negru, ienupăr, helichrysum, lemn de santal și susan a crescut toxicitatea carbarilului la țânțarii Aedes aegypti. Valorile SR ale larvelor de Aedes aegypti variază de la 1,0 la 7,0. În schimb, niciunul dintre agenții de extracție a aerului nu a fost toxic pentru țânțarii adulți Aedes. În acest stadiu, nu au fost raportate efecte sinergice pentru combinația de Aedes aegypti și EO-carbaril. PBO a fost utilizat ca și control pozitiv pentru a spori toxicitatea carbarilului împotriva țânțarilor Aedes. Valorile SR ale larvelor și adulților de Aedes aegypti sunt de 4,9-9,5 și, respectiv, 2,3. Au fost testate doar amestecuri binare de permetrin și EO sau PBO pentru activitatea larvicidă. Amestecul EO-permetrină a avut un efect antagonist, în timp ce amestecul PBO-permetrină a avut un efect sinergic împotriva țânțarilor Aedes. Larve de Aedes aegypti. Cu toate acestea, experimentele doză-răspuns și evaluarea SR pentru amestecurile PBO-permetrină nu au fost încă efectuate. Deși s-au obținut puține rezultate privind efectele sinergice ale combinațiilor fitosintetice împotriva vectorilor de țânțari, aceste date susțin rezultatele existente, care deschid perspectiva adăugării de sinergici nu numai pentru a reduce doza aplicată, ci și pentru a crește efectul de ucidere. Eficiența insectelor. În plus, rezultatele acestui studiu au demonstrat pentru prima dată că uleiurile de C. rotundus și A. galanga exercită sinergic o eficacitate semnificativ mai mare împotriva tulpinilor de țânțari Aedes sensibile și rezistente la piretroizi, comparativ cu PBO, atunci când sunt combinate cu toxicitatea permetrinei. Aedes aegypti. Cu toate acestea, rezultate neașteptate ale analizei sinergice au arătat că uleiul de C. verum a avut cea mai mare activitate anti-adult împotriva ambelor tulpini de Aedes. În mod surprinzător, efectul toxic al permetrinei asupra Aedes aegypti a fost nesatisfăcător. Variațiile efectelor toxice și ale efectelor sinergice se pot datora parțial expunerii la diferite tipuri și niveluri de componente bioactive din aceste uleiuri.
În ciuda eforturilor de a înțelege cum se poate îmbunătăți eficiența, mecanismele sinergice rămân neclare. Posibilele motive pentru eficacitatea și potențialul sinergic diferit pot include diferențe în compoziția chimică a produselor testate și diferențe în ceea ce privește susceptibilitatea la țânțari asociate cu starea și dezvoltarea rezistenței. Există diferențe între componentele majore și minore ale oxidului de etilenă testate în acest studiu, iar unii dintre acești compuși s-au dovedit a avea efecte repelente și toxice împotriva unei varietăți de dăunători și vectori de boli [61,62,64,67,68]. Cu toate acestea, principalii compuși caracterizați în uleiurile de C. rotundus, A. galanga și C. verum, cum ar fi cipernul, β-bisabolenul și cinamaldehida, nu au fost testați în această lucrare pentru activitățile lor anti-adult și sinergice împotriva Ae, respectiv Aedes aegypti. Prin urmare, sunt necesare studii viitoare pentru a izola ingredientele active prezente în fiecare ulei esențial și a elucida eficacitatea lor insecticidă și interacțiunile sinergice împotriva acestui vector de țânțari. În general, activitatea insecticidă depinde de acțiunea și reacția dintre otrăvuri și țesuturile insectelor, care poate fi simplificată și împărțită în trei etape: penetrarea în pielea corpului insectei și membranele organelor țintă, activarea (= interacțiunea cu ținta) și detoxifiere a substanțelor toxice [57, 69]. Prin urmare, sinergismul insecticidului, care are ca rezultat o eficacitate crescută a combinațiilor de toxici, necesită cel puțin una dintre aceste categorii, cum ar fi penetrarea crescută, activarea mai mare a compușilor acumulați sau o detoxifiere mai puțin redusă a ingredientului activ al pesticidului. De exemplu, toleranța energetică întârzie penetrarea cuticulelor printr-o cuticulă îngroșată și rezistența biochimică, cum ar fi metabolismul insecticidului îmbunătățit observat la unele tulpini de insecte rezistente [70, 71]. Eficacitatea semnificativă a substanțelor esențiale (OE) în creșterea toxicității permetrinei, în special împotriva PMD-R, poate indica o soluție la problema rezistenței la insecticide prin interacțiunea cu mecanismele de rezistență [57, 69, 70, 71]. Tong și Blomquist [35] au susținut rezultatele acestui studiu demonstrând o interacțiune sinergică între OE și pesticidele sintetice. În cazul *E. aegypti*, există dovezi ale activității inhibitoare împotriva enzimelor detoxifiante, inclusiv monooxigenazele și carboxilesterazele citocromului P450, care sunt strâns asociate cu dezvoltarea rezistenței la pesticidele tradiționale. Se spune că PBO nu este doar un inhibitor metabolic al monooxigenazei citocromului P450, ci și îmbunătățește penetrarea insecticidelor, așa cum este demonstrat de utilizarea sa ca și control pozitiv în studiile sinergice [35, 72]. Interesant este că 1,8-cineolul, una dintre componentele importante găsite în uleiul de galangal, este cunoscut pentru efectele sale toxice asupra speciilor de insecte [22, 63, 73] și s-a raportat că are efecte sinergice în mai multe domenii de cercetare a activității biologice [74]. ... ,75,76,77]. În plus, 1,8-cineolul în combinație cu diverse medicamente, inclusiv curcumina [78], 5-fluorouracil [79], acidul mefenamic [80] și zidovudina [81] are, de asemenea, un efect de promovare a permeației. in vitro. Astfel, posibilul rol al 1,8-cineolului în acțiunea insecticidă sinergică nu este doar ca ingredient activ, ci și ca agent de intensificare a penetrării. Datorită sinergismului mai mare cu permetrina, în special împotriva PMD-R, efectele sinergice ale uleiului de galangal și uleiului de trichosante observate în acest studiu pot rezulta din interacțiuni cu mecanisme de rezistență, adică permeabilitate crescută la clor. Piretroizii cresc activarea compușilor acumulați și inhibă enzimele detoxifiante, cum ar fi monooxigenazele și carboxilesterazele citocromului P450. Cu toate acestea, aceste aspecte necesită studii suplimentare pentru a elucida rolul specific al OE și al compușilor săi izolați (singuri sau în combinație) în mecanismele sinergice.
În 1977, s-au raportat niveluri tot mai mari de rezistență la permetrină în rândul principalelor populații de vectori din Thailanda, iar în deceniile următoare, utilizarea permetrinei a fost în mare parte înlocuită cu alte substanțe chimice piretroide, în special cele înlocuite cu deltametrină [82]. Cu toate acestea, rezistența vectorilor la deltametrină și alte clase de insecticide este extrem de frecventă în întreaga țară din cauza utilizării excesive și persistente [14, 17, 83, 84, 85, 86]. Pentru a combate această problemă, se recomandă rotirea sau reutilizarea pesticidelor aruncate care erau anterior eficiente și mai puțin toxice pentru mamifere, cum ar fi permetrina. În prezent, deși utilizarea permetrinei a fost redusă în programele recente de combatere a țânțarilor de către guvernele naționale, rezistența la permetrină poate fi încă întâlnită în rândul populațiilor de țânțari. Acest lucru se poate datora expunerii țânțarilor la produsele comerciale de combatere a dăunătorilor de uz casnic, care constau în principal din permetrin și alți piretroizi [14, 17]. Astfel, reutilizarea cu succes a permetrinei necesită dezvoltarea și implementarea unor strategii de reducere a rezistenței vectorilor. Deși niciunul dintre uleiurile esențiale testate individual în acest studiu nu a fost la fel de eficient ca permetrina, colaborarea cu permetrina a dus la efecte sinergice impresionante. Aceasta este o indicație promițătoare a faptului că interacțiunea uleiurilor esențiale cu mecanismele de rezistență are ca rezultat o combinație a permetrinei cu uleiuri esențiale mai eficientă decât insecticidul sau uleiul esențial singur, în special împotriva tulpinii PMD-R Ae. Aedes aegypti. Beneficiile amestecurilor sinergice în creșterea eficacității, în ciuda utilizării unor doze mai mici pentru controlul vectorilor, pot duce la o gestionare îmbunătățită a rezistenței și la reducerea costurilor [33, 87]. Din aceste rezultate, este îmbucurător de observat că uleiurile esențiale de A. galanga și C. rotundus au fost semnificativ mai eficiente decât uleiul de peretrină în sinergizarea toxicității permetrinei atât la tulpinile MCM-S, cât și la cele PMD-R și reprezintă o alternativă potențială la ajutoarele ergogenice tradiționale.
Acetilele esențiale selectate au avut efecte sinergice semnificative în creșterea toxicității la adulți împotriva PMD-R Ae. aegypti, în special uleiul de galangal, are o valoare SR de până la 1233,33, indicând faptul că OE are un potențial larg ca agent sinergic în creșterea eficacității permetrinei. Acest lucru poate stimula utilizarea unui nou produs natural activ, care împreună ar putea crește utilizarea produselor de combatere a țânțarilor extrem de eficiente. De asemenea, dezvăluie potențialul oxidului de etilenă ca agent sinergic alternativ pentru a îmbunătăți eficient insecticidele mai vechi sau tradiționale pentru a aborda problemele de rezistență existente la populațiile de țânțari. Utilizarea plantelor ușor disponibile în programele de combatere a țânțarilor nu numai că reduce dependența de materialele importate și scumpe, dar stimulează și eforturile locale de consolidare a sistemelor de sănătate publică.
Aceste rezultate arată clar efectul sinergic semnificativ produs de combinația dintre oxidul de etilenă și permetrină. Rezultatele evidențiază potențialul oxidului de etilenă ca agent sinergic pentru plante în controlul țânțarilor, crescând eficacitatea permetrinei împotriva țânțarilor, în special în populațiile rezistente. Dezvoltările și cercetările viitoare vor necesita bioanaliză sinergică a uleiurilor de galangal și alpinia și a compușilor acestora izolați, combinații de insecticide de origine naturală sau sintetică împotriva mai multor specii și stadii de țânțari și teste de toxicitate împotriva organismelor nevizate. Utilizarea practică a oxidului de etilenă ca agent sinergic alternativ viabil.
Organizația Mondială a Sănătății. Strategia globală pentru prevenirea și controlul febrei dengue 2012–2020. Geneva: Organizația Mondială a Sănătății, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G., et al. Virusul Zika: istorie, apariție, biologie și perspective de control. Cercetarea antivirale. 2016;130:69–80.
Organizația Mondială a Sănătății. Fișă informativă despre febra dengue. 2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/. Data accesării: 20 ianuarie 2017
Departamentul de Sănătate Publică. Starea actuală a cazurilor de febră dengue și febră hemoragică dengue în Thailanda. 2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf. Data accesării: 6 ianuarie 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ. 35 de ani de prevenire a febrei dengue și control al vectorilor în Singapore. Boala infecțioasă bruscă. 2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identificarea provocărilor și propunerea de soluții pentru controlul vectorilor virali Aedes aegypti. PLOS Medicine. 2008;5:362–6.
Centrele pentru Controlul și Prevenirea Bolilor. Febra dengue, entomologie și ecologie. 2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/. Data accesării: 6 ianuarie 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE. Comparație a activității larvicide a frunzelor, scoarței, tulpinilor și rădăcinilor de Jatropa curcas (Euphorbiaceae) împotriva vectorului malariei Anopheles gambiae. SZhBR. 2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Caracteristicile habitatului larvelor de Anopheles în zonele afectate de malarie din programul de eradicare a malariei din sud-estul Iranului. Asia Pacific J Trop Biomed. 2014;4(Supliment 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Recenzie a abordărilor privind controlul vectorilor, prevenirea și controlul focarelor de virus West Nile și provocările cu care se confruntă Europa. Parasites vector. 2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Selecția și mecanismele moleculare ale rezistenței la cipermetrină la omizile roșii (Amsacta albistriga Walker). Fiziologia biochimică a dăunătorilor. 2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Studiu de laborator privind rezistența la permetrin și rezistența încrucișată a Culex quinquefasciatus la alte insecticide. Centrul de Cercetare Palastor. 2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD. Chimia pesticidelor: Bunăstarea umană și mediul înconjurător, vol. 3: Mecanism de acțiune, metabolism și toxicologie. New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. O analiză a rezistenței la insecticide și a evitării comportamentale a vectorilor de boli umane în Thailanda. Parasites vector. 2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Modele actuale de rezistență la insecticide în rândul vectorilor de țânțari din Thailanda. Southeast Asia J Trop Med Public Health. 1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Starea malariei în Thailanda. Southeast Asia J Trop Med Public Health. 2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Frecvența temporală a mutațiilor de rezistență la inhibarea inhibării țânțarilor Aedes aegypti din Chiang Mai, Thailanda, și impactul mutațiilor asupra eficienței spray-urilor termice cu ceață care conțin piretroizi. Aktatrop. 2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Rezistența la insecticide în principalii vectori dengue Aedes albopictus și Aedes aegypti. Fiziologia biochimică a dăunătorilor. 2012;104:126–31.
Data publicării: 08 iulie 2024